可見分光光度計(jì),在更換光源燈、重新安裝、搬運(yùn)或檢修后,以及機(jī)器打工不正常時,都要進(jìn)行波長校正。正常工作的的儀器,每隔一段時間也要測定一次波長,必要時進(jìn)行校正,這樣才能保證波長讀數(shù)與通過樣品的波長符合,保證儀器的靈敏度。
那么分光光度計(jì)的波長如何矯正?常用譜釹濾光片校正法,適用于721型可見分光光度計(jì)的波長校正,常以585nm或529nm處的吸收峰或T%為標(biāo)準(zhǔn)。
鑒于721型可見分光光度計(jì)的出射光波長較寬,不易將573nm和585nm的兩峰或兩谷分離,校正時易產(chǎn)生誤差,故推薦用529nm處的峰或谷為標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行波長校正。校正時,將機(jī)器按要求預(yù)熱。要求電源電壓穩(wěn)定。波長度盤置580nm處,T%調(diào)至頭號,在比色杯處放一白紙條,觀望是否有光強(qiáng)均勻、邊緣無光暈或雜光的光斑,如不符合要求,可調(diào)節(jié)燈泡位置使其符合要求,是為波長校正的粗調(diào)。再把靈敏度扭置于“1”(最低檔),波長度盤對準(zhǔn)529nm,電表機(jī)械零點(diǎn)為零,在光路空白時調(diào)T%為100%T,并反復(fù)查零點(diǎn)和100%T穩(wěn)定資訊。將譜釹濾光片插入光路,漸漸旋轉(zhuǎn)波長度盤,找到透光率最低的一籌(向左右微旋波長度盤時,該點(diǎn)透光率值均加大),這一籌即為波長529nm。測定波長度盤的指示值是不是529nm,如指示值為534nm,此時波長工誤差為5nm,超出規(guī)定(±1nm)必須進(jìn)行調(diào)整。
調(diào)整方式:將波長度盤對準(zhǔn)529nm,從光路取出譜釹濾光片,光路空白時調(diào)電表指針到100%T,再將譜釹濾光片插入光路。打開機(jī)器左邊小蓋板,找到波長校正螺絲(3個中左邊柄長的這個);反時針方向微微調(diào)節(jié)(負(fù)誤差時順時針方向),使電表指針的指示T%為最低。反復(fù)測定波長誤差資訊,直到符合機(jī)器技術(shù)指標(biāo)為止。蓋好左邊小蓋板,校正結(jié)束。