銀杏葉為銀杏科植物銀杏的干燥葉。2005版《中國(guó)藥典》一部采用高效液相色譜法,以槲皮素、山奈素、異鼠李素為對(duì)照,測(cè)定總黃酮苷的含量。
2005版《中國(guó)藥典》銀杏葉含量測(cè)定項(xiàng)下:
1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm。理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不得低于2500。
2、供試品溶液的制備
取本品中粉約1g,用十分之一電子天平精密稱定,置索氏提取器中,加三氯甲烷回流提取2小時(shí),棄去溶劑,藥渣揮干,加甲醇回流提取4小時(shí),提取液蒸干,殘?jiān)蛹状?25%鹽酸溶液(4:1)混合液25ml,加熱回流30分鐘,放冷,轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中,并加甲醇至刻度,搖勻,即得。
用HPLC法測(cè)定銀杏葉總黃酮苷的含量時(shí),常用的流動(dòng)相系統(tǒng)為甲醇-磷酸系統(tǒng)。
3、其他測(cè)定
測(cè)定銀杏葉片劑總銀杏黃酮的含量,采用高效液相色譜儀色譜柱為Hypersil ODS 柱(205mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:磷酸緩沖液(pH2)-四氫呋喃-甲醇-異丙醇(60:15:10:15);檢測(cè)波長(zhǎng)380nm.
用反相高效液相色譜法測(cè)定銀杏葉中槲皮素、異鼠李素、山萘酚等6種黃酮成分的含量,采用高效液相色譜儀色譜柱為ZorbaxODS C18 柱(150mm×4mm,5μm);流動(dòng)相:A.MeOH, B.四氫呋喃(THF)-H2O-HCOOH(34:65:1),梯度洗脫;;檢測(cè)波長(zhǎng)350nm;柱溫25℃。以單酚酸B(salvianolic acidB)為內(nèi)標(biāo)。銀杏葉用丙酮和鹽酸混合溶液回流提取。
以超臨界流體萃取(SFE) 銀杏葉粗提物中槲皮素和山奈素, 以膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法(MECC) 測(cè)定這兩種成分的含量。SFE條件:壓力42mPa;溫度60℃;改性劑0.2ml乙醇;動(dòng)態(tài)萃取體積4ml;靜態(tài)萃取時(shí)間4min;接收液乙醇。膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜條件:空心熔融石英毛細(xì)管柱(55cm×75μm);電壓18kV;緩沖液的終濃度25mmol/L NaH2PO 46.25mmol/L-Na2B4O7;SDS 35mmol/L;pH8.5;溫度29℃;檢測(cè)波長(zhǎng)254nm;進(jìn)樣時(shí)間8s。