依據(jù):《GMP》與藥品生產(chǎn)質(zhì)量檢驗的要求
目的:建立紫外分光光度計標(biāo)準(zhǔn)操作及維修保養(yǎng)規(guī)程,用以保證實驗儀器操作的一致性。
范圍:紫外分光光度計
1、技術(shù)參數(shù)
1.1工作波段:200—800nm
1.2波長精度:±0.5nm
1.3雜散光:在于220nm處低于1%
1.4分辨率:儀器能分開貢365.02,365.48,366.29 nm三條譜線。
1.5偷光率測量范圍:0—200%T(數(shù)顯100.0相當(dāng)即于100%T)
1.6吸光度測量范圍:—0.301—3A(數(shù)顯1.000相當(dāng)于1A)
1.7透光率精度:±0.5%
1.8透光率重現(xiàn)性:0.5%
1.9T—A轉(zhuǎn)換精度:±0.001A
1.10比色皿誤差自動校正精度:±0.1%T
1.11環(huán)境條件:溫度5—35℃濕度≤85%
1.12電壓:220V
2、操作前準(zhǔn)備
2.1插上電源插頭,閉合光源電器箱開關(guān),“電源”指示燈亮。
2.2選擇燈源:
a.閉合“鎢燈”開關(guān),“鎢燈”指示燈亮,鎢燈被點燃。
b.閉合“氘燈”開關(guān),扳鈕向嚇—3秒,燈絲被加熱后,立即將開關(guān)向上打,“氘燈”指示燈亮,氘燈被引燃后,扳鈕自動恢復(fù)到中間位置。
2.3光源選擇,根據(jù)測量的波段范圍選擇好光源,利用撥桿進行。
2.4將波長指示器置于所需要測的波長。
2.5根據(jù)波長選擇比色皿,對于350 nm以上的波長,可以用玻璃比色皿;對于350 nm溶液以下的波長一定要用石英,將比色皿放入托架內(nèi)(其中一個比色皿放標(biāo)準(zhǔn)溶液,其他比色皿放被測溶液),然后蓋好。
2.6打開“電源”開關(guān),儀器預(yù)熱20分鐘。
2.7操作過程中出現(xiàn)199.9數(shù)字閃爍,表示光能量大強,應(yīng)首先打開試樣室蓋(隔斷光路),然后減小狹縫或調(diào)整光楔(100%T旋鈕)。
2.8如果波長讀數(shù)“零位”走失時,所需波長與計數(shù)器顯示值位置不對,可用數(shù)量零級光譜來校正,方法如下:松開#15(2只)鎖緊螺釘,轉(zhuǎn)動#撥桿,使計數(shù)
器讀數(shù)為000,再轉(zhuǎn)動#1波長手輪,使輸出光強數(shù)碼顯示T值為最大。反復(fù)幾次使零級光譜與計數(shù)器“零位”相一致后,重新鎖緊#(2只)螺釘。
3、操作過程
3.1透過率、吸收度測量
a.暗電流調(diào)零:開啟電源后,若試樣室蓋未打開,將顯示提示符P.1(請做第一步驟操作),打開試樣室蓋直到接觸檢測開關(guān),提示符P.1消失,顯示暗電流值。如果它的絕對值小于5.0,則兩秒內(nèi)自動歸零,否則可調(diào)節(jié)面板上之0%T旋鈕。
b.調(diào)整參比訊號(100T/OA):微機所顯示的提示符為P.2(請做第二步操作)。將T—A—C旋鈕開關(guān)置T/A,參比溶液放進1號試樣槽并移入光路,關(guān)閉試樣室蓋,顯示參比訊號強度,調(diào)整狹縫和光楔(試樣槽拉手左面之100%T旋鈕),使顯示數(shù)在90.0—119.9%T或相應(yīng)A值范圍以內(nèi),2秒以內(nèi)將自動調(diào)整為100%T/OA。
c.比色皿誤差校正:為校正比色皿的系統(tǒng)誤差,要求在同一次測量過程中,比色皿與槽位編號一一照應(yīng)。將使用的比色皿盛參比溶液放進試樣槽,移入光路,所顯示的T(或A值)就反映了該與1號槽中比色皿之間的配對誤差。按一下ADJ(Adjust)校正鍵,則誤差數(shù)據(jù)存入微機并自動校正為100%T/OA。這項操作在每次開機后只需作一次,若所用的比色皿配對性很好,可免去這一步驟。開機時,校正系數(shù)初始值為1,即相當(dāng)于不校正。
d.用同比色皿盛被測溶液放進同一試樣槽,則顯示校正后的透過率或吸光率。
3.2濃度測量
a.標(biāo)準(zhǔn)對照法
b.按3.1節(jié)(1)—(3)操作。
c.將標(biāo)準(zhǔn)濃度的樣品放如光路。
d.旋鈕開關(guān)至C,分別按三個濃度置數(shù)鍵,使顯示數(shù)與已知濃度值一致,濃度值僅取其三為有效數(shù)字,小數(shù)點位置自定義。
e.將被測式樣移入光路,則顯示樣品的濃度(比色皿誤差已校正)。
3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線法(標(biāo)準(zhǔn)曲線為直線)
a.按3.1節(jié)(1)—(3)操作。
b.旋鈕至A, 調(diào)整光楔使A值變化至標(biāo)準(zhǔn)曲線高端某一點的坐標(biāo)A0。
c.旋鈕至C,按濃度置數(shù)鍵顯示數(shù)與對應(yīng)于A0的濃度值C0一致。
d.重新調(diào)整對比訊號后按(1)之(4)操作。
3.4測試完畢,依次關(guān)閉主機電源開關(guān),電氣箱開關(guān),拔下電源插頭,蓋上護罩。
3.5認真填寫使用操作記錄。
4、保養(yǎng)及注意事項
4.1為了確保儀器能夠穩(wěn)定工作,電壓變動較大的地方,自備220V穩(wěn)壓器一只。
4.2當(dāng)儀器工作時如無輸出、光源不亮,應(yīng)首先檢查保險絲是否有損壞,然后檢查電路。
4.3儀器外殼要良好接地,其余裸露零件其對地電壓不得超過24V
4.4式樣室應(yīng)加干燥劑變色硅膠,并經(jīng)常檢查與更換,保證干燥。
4.5當(dāng)儀器停止工作時應(yīng)切斷電源。
4.6比色皿用畢,應(yīng)立即用蒸餾水沖洗清潔,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦干,
以防止表面光潔度變壞而影響透過率。
4.7為了避免儀器積塵和沾污,在停止工作時間內(nèi)用塑料套子罩住整個儀器,在套子內(nèi)放數(shù)袋硅膠。
4.8儀器使用半年左右或搬動要檢查波長精度等,以確保儀器使用。易耗元件、光電管和光源,通常使用一定時間后要衰老和損壞,必須調(diào)換新的。
4.9燈電亮一段時間后不能用手碰燈,不能留有指紋。
4.10長時間的紫外線照射對眼睛有害,戴上太陽鏡可以保護眼睛。