在日常使用氣相色譜儀時(shí),除去樣品的前處理部分,儀器使用的第一步就是設(shè)置儀器參數(shù)與方法,而設(shè)置的第一步是進(jìn)樣口的參數(shù)設(shè)置。
氣相色譜儀進(jìn)樣器參數(shù)的設(shè)置,與測(cè)定的樣品對(duì)象和樣器的類型都關(guān)。參數(shù)設(shè)置適宜,色譜峰分離效果好;設(shè)置不當(dāng),可能導(dǎo)致本來能夠分開的組分實(shí)際上沒有分開。因此,實(shí)驗(yàn)中常常優(yōu)化進(jìn)樣參數(shù)。
根據(jù)經(jīng)驗(yàn),部分進(jìn)樣參數(shù)的設(shè)置,如進(jìn)樣量、洗針次數(shù)等是相同的,故下面以最為常用的手動(dòng)進(jìn)樣器為例,探討一下進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置對(duì)分離有何影響。
進(jìn)樣器的參數(shù)設(shè)置不當(dāng),可能會(huì)出現(xiàn)如下情況:
1、進(jìn)樣量
進(jìn)樣量的大小直接影響定量結(jié)果。若進(jìn)樣量過大,色譜峰峰形不對(duì)稱,峰變寬,分離度變小,或保留值發(fā)生變化,峰高、峰面積與進(jìn)樣量不成線性關(guān)系,無法定量;若進(jìn)樣量太小,會(huì)因檢測(cè)器靈敏度不夠,不能檢出。對(duì)于填充柱,進(jìn)樣量影響不是太大,但進(jìn)樣量不當(dāng)也會(huì)造成出現(xiàn)混合峰;用FID時(shí),進(jìn)樣量太大會(huì)使火焰熄滅。
2、進(jìn)樣速度
進(jìn)樣速度要快,若進(jìn)樣緩慢,樣品汽化后被載氣稀釋,導(dǎo)致峰形變寬、峰不對(duì)稱,既不利于分離也不利于定量。
3、進(jìn)樣針的清洗
進(jìn)樣針如沒清洗干凈,上一次進(jìn)樣的殘留樣品會(huì)干擾下一次的分析,即進(jìn)樣針的“記憶效應(yīng)”,會(huì)影響分析結(jié)果。
進(jìn)樣器參數(shù)包括進(jìn)樣量、進(jìn)樣時(shí)間、進(jìn)樣針的清洗次數(shù)以及具體進(jìn)樣技術(shù)等,下面分別介紹。
1、進(jìn)樣量與進(jìn)樣時(shí)間
色譜柱最大允許進(jìn)樣量可以通過實(shí)驗(yàn)確定。其它實(shí)驗(yàn)條件不變,僅逐漸加大進(jìn)樣量,直至所出的峰的半峰寬變寬或保留值改變時(shí),此進(jìn)樣量就是最大允許進(jìn)樣量。如內(nèi)徑3-4mm,柱長2m,固定液用量為15-20%的填充柱,液體進(jìn)樣量為0.1-10μL;采用氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)時(shí),進(jìn)樣量一般小于1μL。進(jìn)樣時(shí),要求速度快,這樣可以使樣品氣化后隨載氣以濃縮狀態(tài)進(jìn)入柱內(nèi),峰的原始寬度窄,有利于分離。
2、進(jìn)樣器的“記憶效應(yīng)”
為了減小或消除樣品記憶效應(yīng)的干擾,更換樣品時(shí)要清洗,用同一樣品多次進(jìn)樣時(shí)也要用樣品潤洗進(jìn)樣器。進(jìn)樣器暫時(shí)不用時(shí),更要徹底清洗,否則殘留其中的樣品可能將針芯粘牢,造成進(jìn)樣器報(bào)廢。使用自動(dòng)進(jìn)樣器的用戶,也應(yīng)注意保證進(jìn)樣器的清潔。
3、進(jìn)樣技術(shù)的影響
定量分析的精密度與準(zhǔn)確度,除儀器本身的原因外,主要依賴于進(jìn)樣的重復(fù)性和操作技術(shù)。針對(duì)不同規(guī)格毛細(xì)管柱及特殊的進(jìn)樣方式(柱上進(jìn)樣、分流/不分流進(jìn)樣等),對(duì)插針的快慢、位置、深度和操作人員的熟練程度以及刻度讀數(shù)的準(zhǔn)確度都有一定的要求。