談到實(shí)驗(yàn)中的紫外分光光度法，大家更多關(guān)注的是紫外分光光度計(jì)的儀器性能等等，而往往忽略了比色皿，但是您知道嗎，小小的比色皿其實(shí)也有很多講究，而且對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響也很明顯。
選擇什么樣的比色皿，玻璃還是石英？如果比色皿弄混了，如何鑒別？你知道什么樣的色皿才可以配對(duì)嗎？比色皿的正確清洗方式怎么樣？甚至如何正確拿��？
【比色皿常識(shí)】
比色皿( 又名吸收池，樣品池) 用來(lái)裝參比液、樣品液。配套在光譜分析儀器上，如分光光度計(jì)，血線蛋白分析儀，粒度分析儀等，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量、定性分析。比色皿的制造工藝有兩種, 一種是粘合劑粘合而成, 另一種是高溫熔融而成。比色皿的材料通常來(lái)源于石英、熔凝硅石和光學(xué)玻璃。常用比色皿的形狀有方形、矩形和圓筒形, 容量一般為幾毫升。也有用于少量試樣的微型或超微型毛細(xì)管皿。另外還有高、低溫恒溫比色皿。
比色皿按照使用的波長(zhǎng)范圍分為可見(jiàn)光系列( 稱玻璃比色皿) ，紫外可見(jiàn)光系列( 稱石英比色皿) ，紅外光系列( 稱紅外石英比色皿) 。紫外光度實(shí)驗(yàn)中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿，玻璃比色皿是用光學(xué)玻璃制成的比色皿，只能用于可見(jiàn)光區(qū)，適用于330 ～ 1000nm 波長(zhǎng)范圍;石英比色皿是用熔融石英( 氧化硅) 制成的比色皿，既適用于紫外光區(qū)，也可用于可見(jiàn)光區(qū)，適用于200～ 400nm 波長(zhǎng)范圍。
利用石英和玻璃比色皿在紫外光區(qū)和可見(jiàn)光區(qū)有無(wú)吸收的差異，在紫外光區(qū)時(shí)，由于玻璃比色皿強(qiáng)烈吸收紫外光，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果有影響，石英比色皿不吸收紫外光，不會(huì)影響數(shù)據(jù)，因此在紫外光區(qū)不使用玻璃比色皿而使用石英比色皿; 而在可見(jiàn)光區(qū)，玻璃的影響非常小，可忽略，和石英比色皿一樣均可以使用，但考慮到節(jié)約經(jīng)濟(jì)的因素，由于玻璃比色皿的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于石英比色皿，通常選擇可見(jiàn)光區(qū)使用玻璃比色皿，紫外光區(qū)使用石英比色皿。
【比色皿的鑒別】
方法一: 直觀法
通過(guò)視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)的不同感法觀察和比較比色皿的外觀及澄清程度來(lái)進(jìn)行辨別。
( 1) 比色皿上通常會(huì)有字母標(biāo)識(shí)，玻璃比色皿口沿處有“G”( Glass 玻璃) ，而石英比色皿口沿處有“Q”( Quartz 石英) 或者“QS /S”( Quartz Glass 石英玻璃) 。
( 2) 如果沒(méi)有字母標(biāo)識(shí)或者標(biāo)識(shí)已磨損，可以在口沿處由上往下看，如果棱面發(fā)綠就是玻璃的，透明或發(fā)白就是石英的。更確切地說(shuō)，普通玻璃的斷口是淺綠的，硼酸玻璃的斷口是泛白的，而石英的斷面是透明的。
( 3) 可以聽(tīng)聲辨別，石英敲擊的聲音比較清脆，玻璃器皿敲擊時(shí)發(fā)出的聲音發(fā)悶。
( 4) 石英比玻璃的硬度大，如果把兩個(gè)比色皿對(duì)磨，石英比色皿磨損微小，而玻璃比色皿磨損比較大。
( 5) 可用白熾燈照射，透光度高的是玻璃比色皿，而石英比色皿里面應(yīng)當(dāng)稍渾濁。
以上都是快速簡(jiǎn)單的鑒別方法，除非是光學(xué)專業(yè)人士，否則極易由于個(gè)人差異產(chǎn)生誤差，一般情況只能作為權(quán)宜之法。并且現(xiàn)在的制備工藝精湛，無(wú)論是玻璃比色皿還是石英比色皿外觀都是澄清透明，厚度、質(zhì)量差別不大，因此僅通過(guò)這些感官的直觀鑒別方法在是不可取的。
方法二: 機(jī)試法
使用紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)機(jī)試來(lái)鑒別玻璃、石英比色皿和配對(duì)比色皿。
現(xiàn)行國(guó)家檢定規(guī)程規(guī)定石英比色皿在250nm下吸光度應(yīng)小于0.07abs，若吸光度大于0.07abs 則為玻璃比色皿。
比色皿內(nèi)不放置任何樣品，以空氣為介質(zhì)，波長(zhǎng)設(shè)置250nm，調(diào)零。將比色皿放置在樣品道，吸光值小于0.07abs 的是石英的，反之是玻璃的。
【比色皿配對(duì)】
從使用者的角度來(lái)講, 對(duì)UV-VISS 最關(guān)心的是儀器的穩(wěn)定性和可靠性。所謂穩(wěn)定性, 就是漂移小、重復(fù)性好。所謂可靠性, 就是光度準(zhǔn)確度( PA ) 好, 故障率小, 出了故障能很快排除。但這里PA 是最重要的。研究表明: 影響UV-VISS 的PA 的因素很多, 但從儀器的角度講, 最主要的是雜散光、噪聲、基線平直度 和光譜帶寬。但這只是指UV-VISS 儀器本身的因素。然而, 影響UV-VISS 的PA, 還有一個(gè)長(zhǎng)期被人們忽視的、極其重要的因素, 這就是比色皿的不配對(duì)給UV-VISS 帶來(lái)的分析測(cè)試誤差。
現(xiàn)行的國(guó)家檢定規(guī)程中規(guī)定配對(duì)的兩只比色皿間差值不得超過(guò)±0.5%。因?yàn)樵诳梢?jiàn)光區(qū)，玻璃比色皿和石英比色皿都可以使用，所以可利用每對(duì)比色皿間的透光率直接進(jìn)行比較。
使用4 對(duì)比色皿，在波長(zhǎng)500nm 下，以空氣和純水為介質(zhì)，使用透光率T 進(jìn)行測(cè)量，將每組比色皿中的一只透射率調(diào)為100%，測(cè)量另外一只透光率，凡透射率之差不大于5% ( △T = 0.005 =0.5%) ，即可配對(duì)使用。
