吸光光度法和熒光分析法的異同，為什么熒光法的檢出能力優(yōu)于吸光光度法？
答：原理：紫外－可見(jiàn)吸收光譜法是根據(jù)溶液中物質(zhì)的分子或離子對(duì)紫外和可見(jiàn)光譜區(qū)輻射能的吸收來(lái)研究物質(zhì)的組成和結(jié)構(gòu)的方法，而熒光分析法是由于處于第一激發(fā)單重態(tài)最低能級(jí)的分子以輻射躍遷的形成返回基態(tài)各振動(dòng)能級(jí)時(shí)產(chǎn)生的熒光的分析方法，兩者的區(qū)別在于前者研究的是吸收光譜，且電子躍遷為激發(fā)態(tài)的振動(dòng)能級(jí)到基態(tài)的振動(dòng)能級(jí)間的躍遷。
儀器：熒光分析儀器與熒光分光光度計(jì)的主要差別有：a 熒光分析儀器采用垂直測(cè)量方式，即在與激發(fā)光相垂直的方向測(cè)量熒光，以消除透射光的影響；b 熒光分析器有兩個(gè)單色器，分別用于獲得單色器較好的激發(fā)光和用于分出某一波長(zhǎng)的熒光，消除其它雜散光干擾。
因?yàn)闊晒夥治龇ǖ撵`敏度高，其檢出限通常比分光光度法低2～4個(gè)數(shù)量級(jí)，選擇性也比分光光度法好，這是由于：a 熒光分析儀器在與激發(fā)光相垂直的方向測(cè)量熒光，與分光光度在一直線上測(cè)量相比，消除了透射光的影響，測(cè)量更為準(zhǔn)確，靈敏度高；b 吸光光度法只采用一個(gè)單色器，而熒光分析儀器有兩個(gè)單色器，分別用于獲得單色性較好的激發(fā)光和分出某一波長(zhǎng)的熒光，消除其它雜散光的干擾，其儀器的準(zhǔn)確度、靈敏度也更高；c 熒光測(cè)量中的激發(fā)光源比吸收光度法的光源有更大的發(fā)射強(qiáng)度，光源更穩(wěn)定，因此其儀器的準(zhǔn)確度、靈敏度也就更高，綜上所述，熒光分光光度計(jì)熒光法的檢出限優(yōu)于吸光光度法。
