選購紫外可見分光光度計(jì)時(shí)要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的需要和目的用途來考慮,主要考慮光學(xué)構(gòu)造、光源、探測(cè)方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理等因素。
一、光學(xué)構(gòu)造
一般來說,紫外可見分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩類。
顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測(cè)量,束給定波長(zhǎng)的光通過對(duì)照物,然后再通過實(shí)際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。
雙光束型則是通過一個(gè)斬光輪將束光分成兩束,分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。可以小化光漂移和減少測(cè)量時(shí)間。有些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪,而是利用種光束分光器來代替,將束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y(cè)量的速度,所以雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。
二、光源和檢測(cè)方法
紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng),通常利用氘燈照明。鎢燈和鹵素?zé)舭阒桓采w可見光部分(大約380 nm 到800 nm),而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。
分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的個(gè)重要因素。實(shí)驗(yàn)室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進(jìn)行ELISAs分析和比色分析。
分光光度計(jì)的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度,可以投射出實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量,可變的單色儀的狹縫寬度能使臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。
為了測(cè)量吸光值,分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管和光敏二管。PMTs提供快速的反應(yīng)時(shí)間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。
三、樣品類型
在大部分的樣品類型中,紫外分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室需求。但盡管對(duì)于小實(shí)驗(yàn)室來說,制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間。用小試管cuvette裝樣品容量般從1 μl-5ml,并且些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現(xiàn)了柔韌性。