一.分光光度法
分光光度法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,從而對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
常用的波長(zhǎng)范圍為:(1)200~400nm的紫外光區(qū)(2)400~760nm的可見(jiàn)光區(qū)(3)2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。
二.分光光度計(jì)
分光光度計(jì)是精密光學(xué)儀器,分為紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、可見(jiàn)分光光度計(jì)(或比色計(jì))、原子吸收分光光度計(jì)(或紅外分光光度計(jì))。
正確安裝、使用和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度有重要作用。除此外為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度,所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。
三.分光光度計(jì)對(duì)工作環(huán)境的要求
①儀器應(yīng)安放在干燥的房間內(nèi),使用溫度為5~35℃.相對(duì)濕度不超過(guò)85%。
②儀器應(yīng)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上,且避免強(qiáng)烈的振動(dòng)或持續(xù)的振動(dòng)。
③室內(nèi)照明不宜太強(qiáng),且應(yīng)避免直射日光的照射。
④電扇不宜直接向儀器吹風(fēng),以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用。
⑤盡量遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的磁場(chǎng)、電場(chǎng)及發(fā)生高頻波的電器設(shè)備。
⑥供給儀器的電源電壓為AC220V±22V,頻率為50Hz±1Hz,并必須裝有良好的接地線。推薦使用功率為1000w以上的電子交流穩(wěn)壓器或交流恒壓穩(wěn)壓器,以加強(qiáng)儀器的抗干擾性能。
⑦避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場(chǎng)所使用。
四.分光光度計(jì)的日常維護(hù)和保養(yǎng)
①光源。
光源的壽命有限,為了延長(zhǎng)光源使用壽命,在不使用儀器時(shí)不要開(kāi)光源燈,應(yīng)盡量減少開(kāi)關(guān)次數(shù)。在短時(shí)問(wèn)的工作間隔內(nèi)可以不關(guān)燈。剛關(guān)閉的光源燈不能立即重新開(kāi)啟。
儀器連續(xù)使用時(shí)間不應(yīng)超過(guò)3h。若需長(zhǎng)時(shí)間使用,最好間歇30min。
如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定,應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置,不要用手直接接觸窗口或燈泡,避免油污沾附。若不小心接觸過(guò),要用無(wú)水乙醇擦拭。
②單色器。
單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi),不能拆開(kāi)。選擇波長(zhǎng)應(yīng)平衡地轉(zhuǎn)動(dòng),不可用力過(guò)猛。為防止色散元件受潮生霉,必須定期更換單色器盒干燥劑(硅膠)。若發(fā)現(xiàn)干燥劑變色,應(yīng)立即更換。
③吸收池。
必須正確使用吸收池,應(yīng)特別注意保護(hù)吸收池的兩個(gè)光學(xué)面。
④檢測(cè)器。
光電轉(zhuǎn)換元件不能長(zhǎng)時(shí)間曝光,且應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。
⑤當(dāng)儀器停止工作時(shí),必須切斷電源。
⑥為了避免儀器積灰和沾污,在停止工作時(shí),應(yīng)蓋上防塵罩。
⑦儀器若暫時(shí)不用要定期通電,每次不少于20~30min,以保持整機(jī)呈干燥狀態(tài),并且維持電子元器件的性能。