一.按使用波長范圍劃分
可分為可見分光光度計(jì)和紫外可見分光光度汁兩類。前者使用的波長范圍為400~780nm,后者使用的波長范圍為200~400nm。
二.按光路劃分
可分為單光束式及雙光束式兩類。
所謂單光束是指從光源中發(fā)出的光,經(jīng)過單色器等一系列光學(xué)元件及吸收池后,最后照在檢測器上時(shí)始終為一束光。常用的單光束紫外可見分光光度計(jì)有UV1600型、UV1600PC 型、UV1800PC型等。
單光束分光光度計(jì)的特點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡單,主要適于作定量分析。
雙光束分光光度計(jì)是指從光源中發(fā)出的光經(jīng)過單色器后被一個(gè)旋轉(zhuǎn)的扇形反射鏡(即切光器)分為強(qiáng)度相等的兩束光,分別通過參比溶液和樣品溶液。利用另一個(gè)與前一個(gè)切光器同步的切光器,使兩束光在不同時(shí)間交替地照在同一個(gè)檢測器上,通過一個(gè)同步信號(hào)發(fā)生器對(duì)來自兩個(gè)光束的信號(hào)加以比較,并將兩信號(hào)的比值經(jīng)對(duì)數(shù)變換后轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的吸光度值。
雙光束分光光度計(jì)的特點(diǎn)是能連續(xù)改變波長,自動(dòng)地比較樣品及參比溶液的透光強(qiáng)度,自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。對(duì)于必須在較寬的波長范圍內(nèi)獲得復(fù)雜的吸收光譜曲線的分析,此類儀器極為合適。
三.按測量時(shí)提供的波長數(shù)劃分
可分為單波長分光光度計(jì)和雙波長分光光度計(jì)兩類。
雙波長分光光度計(jì)與單波長分光光度計(jì)的主要區(qū)別在于采用雙單色器,以同時(shí)得到兩束波長不同的單色光。光源發(fā)出的光分成兩束,分別經(jīng)兩個(gè)可以自由轉(zhuǎn)動(dòng)的光柵單色器,得到兩束具有不同波長A1和A2的單色光。借切光器,使兩束光以一定的時(shí)間問隔交替照射到裝有試液的吸收池上,由檢測器顯示出試液在波長λ1和λ2的透射比差值△r或吸光度差值△A,則△A=Aλ1-Aλ2=﹙Eλ1-Eλ2)bc。由式可知,△A與吸光物質(zhì)c成正比。這就是雙波長分光光度進(jìn)行定量分析的理論根據(jù)。
這類儀器特別適合混合物和渾濁樣品的定量分析,準(zhǔn)確度高,可進(jìn)行導(dǎo)數(shù)光譜分析等。