高效液相色譜儀主要有分析型、制備型和專用型三類。一般由五個(gè)部分組成，分別是高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
一. 高壓輸液系統(tǒng)
由貯液裝置、高壓輸液泵、過濾器、脫氣裝置等組成。
1. 貯液器：貯液器用于存放溶劑。溶劑必須很純，貯液器材料要耐腐蝕，對(duì)溶劑呈惰性。貯液器應(yīng)配有溶劑過濾器，以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。溶劑過濾器一般用耐腐蝕的鎳合金制成，空隙大小一般為2mm。
2. 脫氣裝置：脫氣的目的是為了防止流動(dòng)相從高壓柱內(nèi)流出時(shí)，釋放出氣泡進(jìn)入檢測(cè)器而使噪聲劇增，甚至不能正常檢測(cè)。
3. 高壓輸液泵：高壓輸液泵是高效液相色譜儀的重要部件，是驅(qū)動(dòng)溶劑和樣品通過色譜柱和檢測(cè)系統(tǒng)的高壓源，其性能好壞直接影響分析結(jié)果的可靠性。
對(duì)高壓泵的基本要求是：
①流量穩(wěn)定；②輸出壓力高，最高輸出壓力為50Mpa；③流量范圍寬，可在0.01～10ml／min范圍任選。④耐酸、堿、緩沖液腐蝕。⑤壓力波動(dòng)小。
二. 進(jìn)樣器
進(jìn)樣器一般要求密封性好，死體積小，重復(fù)性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力和流量波動(dòng)小，并便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。
高壓進(jìn)樣閥是目前廣泛采用的一種方式。閥的種類很多，有六通閥、四通閥，雙路閥等。以六通進(jìn)樣閥最為常用。
三.分離系統(tǒng)
色譜分離系統(tǒng)包括色譜柱、固定相和流動(dòng)相。色譜柱是其核心部分，柱應(yīng)具備耐高壓、耐腐蝕、抗氧化、密封不漏液和柱內(nèi)死體積小、柱效高、柱容量大、分析速度快、柱壽命長(zhǎng)的要求。通常采用優(yōu)質(zhì)不銹鋼管制成。
色譜柱按內(nèi)徑不同可分為常規(guī)柱、快速柱和微量柱三類。
常規(guī)分析柱柱長(zhǎng)一般為10~25cm，內(nèi)徑4 ~ 5mm，固定相顆粒直徑為 5 ~ 10 mm。為了保護(hù)分析柱不受污染，一般在分析柱前加一短柱，約數(shù)厘米長(zhǎng)，稱為保護(hù)柱。
（微量分析柱內(nèi)徑小于l mm，凝膠色譜往內(nèi)徑3～12 mm，制備往內(nèi)徑較大，可達(dá)25 mm以上。）
四. 檢測(cè)系統(tǒng)
檢測(cè)器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的信號(hào)，常用檢測(cè)器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。
1. 紫外可見吸收檢測(cè)器（ultraviolet－visibledetector，UVD）
紫外可見吸收檢測(cè)器（UVD）是HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測(cè)器。其特點(diǎn)是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測(cè)限可達(dá)1ng，檢測(cè)后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測(cè)器串聯(lián)使用。紫外可見檢測(cè)器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計(jì)相似，實(shí)際上就是裝有流動(dòng)地的紫外可見光度計(jì)。
（1）紫外吸收檢測(cè)器
紫外吸收檢測(cè)器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長(zhǎng)，并安裝一個(gè)光柵型單色器，其波長(zhǎng)選擇范圍寬（190nm～800nm）。它有兩個(gè)流通池，一個(gè)作參比，一個(gè)作測(cè)量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過純的均勻溶劑，則它們?cè)谧贤獠ㄩL(zhǎng)下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強(qiáng)度相等，無信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測(cè)量池時(shí)，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等，這時(shí)有信號(hào)輸出，輸出信號(hào)大小與組分濃度有關(guān)。
局限：流動(dòng)相的選擇受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做 流動(dòng)相，每種溶劑都有截止波長(zhǎng)，當(dāng)小于該截止波長(zhǎng)的紫外光通過溶劑時(shí)，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測(cè)器的工作波長(zhǎng)不能小于溶劑的截止波長(zhǎng)。
（2）光電二極管陣列檢測(cè)器（photodiode array detector， PDAD）
也稱快速掃描紫外可見分光檢測(cè)器，是一種新型的光吸收式檢測(cè)器。它采用光電二極管陣列作為檢測(cè)元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時(shí)檢測(cè)由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長(zhǎng)的光信號(hào)，然后對(duì)二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時(shí)間(tR)和波長(zhǎng)(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時(shí)觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速?zèng)Q定具有最佳選擇性和靈敏度的波長(zhǎng)。
