可見分光光度計的操作步驟具體如下:
一、開機
開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,確認電源是否連接。打開儀器電源開關(guān),等待儀器自檢通過,自檢過程中禁止打開樣品室。
二、使用
儀器自檢結(jié)束后(7個自檢項目均出現(xiàn)OK字樣),按[MAIN MENU]鍵(主菜單),屏幕顯示如下5個功能項: 1. Phtometry(定量運算);2.WavelengthScan(波長掃描模式);3.Time Scan(時間曲線掃描);4.System(系統(tǒng)校正);5.Datadisplay(光度直接測量模式)。按相應(yīng)選項前的數(shù)字鍵,即可進入該選項的下一級子菜單。
1.Phtometry(定量運算)
1)按[MAIN MENU]鍵,再按數(shù)字[1]鍵進入Phtometry子菜單下,選中對應(yīng)的數(shù)字來選擇所需的測定方式:①%T/ABS(透過率/吸光度測定模式);②Ratio(比例測定模式);③Concentration (濃度測定模式或標準曲線模式);
2)按數(shù)字[1]鍵進入%T/ABS(透過率/吸光度測定)子菜單,選中對應(yīng)的數(shù)字鍵來設(shè)定測定條件:①NUM WL(設(shè)定測試波長的數(shù)目,最多可設(shè)定6個不同波長);②WL Setting(設(shè)定測試波長具體數(shù)值)③DataMode(選擇測定吸光度或透光率),設(shè)定完畢后點擊[Enter]鍵確定,所有項目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0] 鍵確定,等待儀器調(diào)整至準備狀態(tài),此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO,將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中,按[Start/Stop] 鍵進行零點的自動調(diào)整,自動調(diào)零完成后,將樣品置于光路中,再按[Start/Stop] 鍵進行測量,儀器的顯示屏自動給出對應(yīng)波長的數(shù)值。
3)按數(shù)字[3]鍵進入③Concentration (濃度測定模式或標準曲線模式),選中對應(yīng)的數(shù)字來設(shè)定條件(波長數(shù)目,波長數(shù)值,標準溶液數(shù)目及濃度),設(shè)定完畢后點擊[Enter]鍵確定,所有項目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定,等待儀器調(diào)整至準備狀態(tài),此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO,將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中,按[Start/Stop] 鍵進行零點的自動調(diào)整,自動調(diào)零完成后,將標準溶液置于光路中,按照濃度從低到高順序依次按[Start/Stop] 鍵進行測量,測量完畢后儀器將自動給出標準曲線,標準曲線下方有三項供選擇:①Process(更改標準曲線的坐標和觀察濃度回歸曲線的數(shù)據(jù));②Measure(直接進入樣品的測量);③Print(打印濃度回歸曲線譜圖和數(shù)據(jù)),選中對應(yīng)的數(shù)字就可執(zhí)行相應(yīng)的功能。
4)如果希望返回上一級菜單,按[CLEAR RETURN] 鍵返回,返回主菜單直接按[MAINMENU]鍵。
2.Wavelength Scan(波長掃描模式)
1)參數(shù)修改:按[MAIN MENU]鍵,再按數(shù)字[2]鍵進入②Wavelength Scan(波長掃描模式)子菜單下,選中對應(yīng)的數(shù)字來選擇所需修改的內(nèi)容, 修改掃描的起始波長,測量模式,圖譜坐標的上下限,掃描速度等等。修改完畢按數(shù)字[0]鍵確定。
2)波長掃描:分別將兩個比色皿裝上空白溶液和樣品溶液,放入比色槽中,按[Start/Stop]鍵進行譜圖掃描(如想終止掃描再次按按[Start/Stop]鍵),待儀器自動進行基線校正,提示拉入樣品自動測試,測試完畢后有掃描圖譜出現(xiàn),下方有相應(yīng)的數(shù)據(jù)處理選項①Process②Baseline③Print;
3)數(shù)據(jù)處理:按數(shù)字[1]鍵進入①Process(數(shù)據(jù)處理),可以讀峰谷值,修改坐標,顯示所有數(shù)據(jù),求一階倒數(shù)等等功能。
3.TimeScan(時間曲線掃描)
同上(二)操作。
4.System(系統(tǒng)校正)
一般不做。
5.Datadisplay(光度直接測量模式)
同上(二)操作。
三、關(guān)機
將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈;關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認可方可離開。
四、注意事項
1.開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。
3.測定時,禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,要盡可能及時清理干凈。
4.實驗結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認可方可離開。
五、問題處理
1、如果儀器不能初始化,關(guān)機重啟;如不成功,請向管理老師反映。
2、如果吸收值異常,依次檢查:波長設(shè)置是否正確(重新調(diào)整波長,并重新調(diào)零)、測量時是否調(diào)零(如被誤操作,重新調(diào)零)、比色皿是否用錯(測定紫外波段時,要用石英比色皿)、樣品準備是否有誤(如有誤,重新準備樣品)。