概述
紫外分光光度法是根據(jù)物質的吸收光譜，來研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。
物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。
一、紫外分光光度計用途
1、檢定物質
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長λ-max和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用。在國內外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。
2、與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質，則兩者的光譜圖應完全一致。如果沒有標樣，也可以和現(xiàn)成的標準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確，精密度高，且測定條件要相同。
3、比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
4、純度檢驗
5、推測化合物的分子結構
6、氫鍵強度的測定
實驗證明，不同的極性溶劑產生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。
7、絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
8、反應動力學研究
9、在有機分析中的應用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學，它是在有機化學和分析化學的基礎上發(fā)展起來的綜合性學科。
二、紫外分光光度計使用注意事項
1、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素
他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。使用紫外分光光度計應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區(qū)的實驗室。
2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜銹蝕的原因之一。因此，使用紫外分光光度計必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內衛(wèi)生條件，防塵。
3、紫外分光光度計儀器使用一定周期后，內部會積累一定量的塵埃，最好由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內部進行除塵工作。同時，將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑。最后，恢復原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護和對主要技術指標的簡易測試方法，自己經常對儀器進行維護和測試，以保證儀器工作在最佳狀態(tài)。
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