一、溫度控制系統(tǒng)
1、冰箱
根據(jù)藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要,必須具備不同控溫級(jí)別的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。
4℃適合儲(chǔ)存某些溶液、試劑、藥品等。
-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。
-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。
0-10℃的冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實(shí)驗(yàn)。
2、液氮罐
有些實(shí)驗(yàn)材料、某些器官組織、細(xì)胞株、菌株及純化的樣品等,要求速凍和長期保存在超低溫環(huán)境下,就需要一個(gè)液氮罐(-196℃)具有經(jīng)濟(jì)、省力和較好地保持細(xì)胞生物學(xué)特性的優(yōu)點(diǎn)。
3、培養(yǎng)箱
37℃恒溫培養(yǎng)箱用于細(xì)菌的固體培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。
CO2培養(yǎng)箱適用于培養(yǎng)各種細(xì)胞,可恒定地提供一定量的CO2(通常5%),用來維持培養(yǎng)液的酸度(pH值)。37℃恒溫空氣搖床可進(jìn)行液體細(xì)菌的培養(yǎng)。
4、水浴鍋
用于保溫。
25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗(yàn),各種生物化學(xué)酶反應(yīng)等試驗(yàn)的保溫。
25-100℃水浴箱用于常規(guī)試驗(yàn)。
5、烘箱
主用于烘干實(shí)驗(yàn)器皿,有些需要溫度高些,有些需要溫度低些。用于RNA方面的實(shí)驗(yàn)用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干。
二、水的凈化裝置
隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展,許多實(shí)驗(yàn)對(duì)水純度的要求越來越高。
1、蒸餾水皿
單蒸水常難以滿足實(shí)驗(yàn)要求。雙蒸水、三蒸水配液,許多實(shí)驗(yàn)要去離子水。
多次蒸餾水可除去水中揮發(fā)性雜質(zhì),不能完全除去水中溶解的氣體雜質(zhì)(Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ))。
2、離子交換器
去離子水—用離子交換法制取的水,稱去離子水。
去離子效果好,但不能除去水中的非離子型雜質(zhì),其中常含有微量的有機(jī)物(樹脂等)。
3、超純水機(jī)
用蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水,磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測(cè)序、酶反應(yīng)、組織和細(xì)胞培養(yǎng)等。
三、菌消毒設(shè)備
分子生物學(xué)所用大部分試劑,而且實(shí)驗(yàn)用具都應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌。
1、蒸汽消毒鍋
用于小批量物品的隨時(shí)消毒。大批實(shí)驗(yàn)物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒且定時(shí)進(jìn)行消毒。
2、紫外線
75%乙醇、0.1%SDS(消毒劑)
一些耐高壓、高溫消毒且可用紫外線照射或乙醇和SDS浸泡。
紫外線照射使用方便,且很方便,但滅菌效果與距離有關(guān),且產(chǎn)生臭氧污染安全,用于無菌室,超凈臺(tái)和塑料用具的消毒。
3、濾器濾膜
不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。
4、煮沸消毒
主用于金屬器械和針急需時(shí)采用。
四、計(jì)量系統(tǒng)
1. 稱量系統(tǒng):
(各種天平)臺(tái)秤、托盤天平、鈕力擺動(dòng)天平、光電分子天平、精密電子分析天平
2. 液體體積的度量:
精:量筒、移液管、微量取液器
粗:刻度試管、燒杯、錐形瓶
3. pH值測(cè)量:
測(cè)定溶液中H+的直接電位的儀器,主要通過一對(duì)電極,在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動(dòng)勢(shì)用pH值表示出來。
pH試紙:
只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計(jì)。而大部分試劑的配制要求嚴(yán)格的pH值,需精確度高(小數(shù)點(diǎn)后兩位)的pH計(jì)。
4. OD值測(cè)量:
光密度、分光光度計(jì)是利用物質(zhì)在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測(cè)量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標(biāo)之一,通過所產(chǎn)生的單色光而測(cè)定某一溶液對(duì)該單色光的吸收值,利用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。
五、離心機(jī)
離心技術(shù)是研究生物的結(jié)構(gòu)和功能中不可缺少的一種物理技術(shù)手段。因?yàn)楦鞣N物質(zhì)在沉淀系數(shù)、浮力、和質(zhì)量等方面有差異,可利用強(qiáng)大的離心力場(chǎng),使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機(jī)?晒┥儆0.05ml到幾升的樣品離心之用。離心技術(shù)應(yīng)用廣泛,包括收集和分離細(xì)胞、細(xì)胞器和生物大分子等。據(jù)其轉(zhuǎn)速的不同,可分為以下幾種類型:
1.普通離心機(jī):
最大轉(zhuǎn)速6000r/m,最大離心力6000g
①醫(yī)用或臺(tái)式離心機(jī):
是離心機(jī)中最簡單而廉價(jià)的,最常用于收集快速沉降系數(shù)的物質(zhì),如紅細(xì)胞、**的沉淀物、酵母菌和細(xì)菌等。
②低速冷凍離心機(jī):
主要用于細(xì)胞、細(xì)胞核、細(xì)胞膜和細(xì)菌的沉淀和收集等。
2. 高速離心機(jī):
最大轉(zhuǎn)速25000r/m,最大離心力89000g
有冷凍和常溫兩種,多用于制備和手收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。
3. 超速離心機(jī):
最大轉(zhuǎn)速9000r/m,最大離心力694000g。
4. 臺(tái)式超速離心機(jī):
最大轉(zhuǎn)速12000r/m,最大離心力625000g。
內(nèi)有紫外燈、照明燈、還應(yīng)有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設(shè)備,是一種提供局部潔凈度的設(shè)備。其原理是鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動(dòng)空氣,經(jīng)過低、中效的過濾器后,通過工作臺(tái)面,使實(shí)驗(yàn)操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。超凈臺(tái)按氣流方向的不同大致有幾種類型:
①側(cè)流式:凈化后氣流,從左側(cè)或右側(cè)通過工作臺(tái)面,流向?qū)?cè),或者從上往下或從下往上流向?qū)?cè),他們都能形成氣流屏障而保障臺(tái)面無菌。
缺點(diǎn):在凈化氣流和外邊氣體交界處,可因氣體的流向而出現(xiàn)負(fù)壓,使少量的未凈化氣體混入,而造成污染。
②外流式:氣流是面向操作人員的方向流動(dòng),從而保證外面氣體不能混入。
缺點(diǎn):在進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)時(shí),對(duì)操作人員不利,但可采用有機(jī)玻璃把上半部分遮擋起來,使氣流往下方流出。
七、電泳系統(tǒng)
電泳技術(shù)是檢測(cè)、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征,甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。核酸和蛋白質(zhì)等都帶有電荷,當(dāng)它們被置于電場(chǎng)中時(shí),能夠移動(dòng)。
電泳裝置由兩部分組成:電源裝置和電泳槽裝置。
①電泳裝置:電源需經(jīng)穩(wěn)流通過穩(wěn)壓器,既能提供穩(wěn)定的直流電,又能輸出穩(wěn)定的電壓。可用于三種:
常度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓0-500v0-15mA
中度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓400-1000v
高度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓1000以上的電源裝置。
②電泳槽裝置:分兩種
水平式電泳槽:一般分為微型電泳槽和大號(hào)水平式電泳槽
垂直式電泳槽:分垂直平板電泳槽和圓柱形電泳槽裝置。
八、PCR儀
Polymerase Chain Reaction儀,也稱DNA熱循環(huán)儀,基因擴(kuò)增,它是使一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩側(cè),從而酶促合成拷貝數(shù)百萬倍的靶序列DNA片段,它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進(jìn)行的DNA變性,引物復(fù)性,DNA聚合酶催化的延伸反應(yīng)三個(gè)過程。
九、凝膠成像分析系統(tǒng)
對(duì)電泳后含溴乙錠(EB)核酸樣品的觀察分析。
十、干燥設(shè)備
1.真空加熱干燥箱:核酸在硝酸纖維素膜和尼龍膜上固定,用于雜交實(shí)驗(yàn)。
2.電泳凝膠干燥箱:電泳后的凝膠進(jìn)行脫水干燥的儀器,一般可將凝膠干燥到一些玻璃紙上,干燥后的凝膠易于保存。
3.液氮冷凍干燥:適用于活性蛋白質(zhì)樣品的干燥與結(jié)晶。
4.真空泵:許多實(shí)驗(yàn)都需要抽真空。如:乙醇沉淀后核酸樣品的干燥,電泳凝膠的干燥等。
十一、其他
1.微波爐:便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱,電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。
2.制冰機(jī):用于制造大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)操作所需的低溫環(huán)境,以減少核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。
3.層析裝置:(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。
真空印記系統(tǒng),DNA合成/測(cè)序儀:這些都是對(duì)核酸進(jìn)行深入研究的必備儀器。
4.磁力攪拌器:多角度旋轉(zhuǎn)混勻器、快速振蕩混合器:用于混合儀器。
5.組織勻漿器:超聲組織及細(xì)胞破碎器,用其進(jìn)行樣品的分離提純實(shí)驗(yàn)。
6.通風(fēng)櫥:很多溶劑能逸出毒氣,必備柜,放射性試驗(yàn)還要有有機(jī)玻璃屏蔽。
7.玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器:用于酚等有機(jī)溶劑的蒸餾。
8.Tip頭、Eppendorf管:
微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗滌,硅化消毒后反復(fù)使用。對(duì)一些要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn),如RNA的提取、保存等操作,應(yīng)使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應(yīng)備有常用規(guī)格的離心管(1000ml、500ml、250ml、50ml、7ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細(xì)胞培養(yǎng)塑料平板等。
9.小型設(shè)備、用具:
定時(shí)器、濾膜、保鮮膜、防護(hù)眼鏡鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應(yīng)使用棕色試劑瓶,如飽和酚、巰基乙醇等)、記號(hào)筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)