一、概述
亞硝酸鹽在肉類(lèi)制品中作為發(fā)色劑限量使用,讓肉制品看起來(lái)紅紅的好看,但是人類(lèi)食入0.3~0.5克的亞硝酸鹽即可引起中毒甚至死亡。由亞硝酸鹽引起食物中毒的機(jī)率較高,中毒事件也經(jīng)常發(fā)生。
肉灌腸中亞硝酸鹽檢測(cè)可以用離子色譜法和分光光度法,本文主要說(shuō)明分光光度法。
二、方案介紹
1、測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)及方法
GB 5009.33-2016,分光光度法
2、所需儀器及試劑
722S可見(jiàn)分光光度計(jì)、十分之一電子天平、電爐、水浴鍋、常用玻璃儀器等,
飽和硼砂溶液、亞鐵氰化鉀溶液、乙酸鋅溶液、亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液、氨基苯磺酸溶液、鹽酸萘乙二胺溶液等。
3、實(shí)驗(yàn)步驟
試樣經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后,在弱酸條件下亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后,再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料,外標(biāo)法測(cè)得亞硝酸鹽含量。具體如下:
(1)前期準(zhǔn)備
用燒杯盛水并用電爐加熱至沸騰,備用(制備70度左右的水);
水浴鍋打開(kāi)電源,讓水沸騰,備用;
取出肉灌腸切開(kāi),并剁碎,用電子天平稱(chēng)取5g試樣置于500 mL容量瓶中,加12.5 mL 飽和硼砂溶液,攪拌均勻,加入70℃左右的水約300 mL,于沸水浴中加熱 15 min,取出置冷水浴中冷卻,并放置至室溫。
(2)提取凈化
往樣品瓶中加入5 mL 亞鐵氰化鉀溶液,搖勻,再加入 5 mL 乙酸鋅溶液,混勻并振蕩提取液,加水至刻度,搖勻,放置30 min,除去上層脂肪,上清液用濾紙過(guò)濾,棄去初濾液30mL,濾液備用。
(3)樣品測(cè)定
吸取40.0 mL 上述濾液于50 mL 帶塞比色管中,另吸取0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL、2.50 mL 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于0.0μg、1.0μg、2.0 μg、3.0 μg、4.0 μg、5.0 μg、7.5 μg、10.0 μg、12.5 μg亞硝酸鈉),分別置于50 mL 帶塞比色管中。
于標(biāo)準(zhǔn)管與試樣管中分別加入2 mL 對(duì)氨基苯磺酸溶液,混勻,靜置3 min~5 min 后各加入1 mL鹽酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混勻,靜置15 min,用2 cm 比色杯,以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn),于波長(zhǎng) 538 nm 處測(cè)吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較。同時(shí)做試劑空白。
4、計(jì)算公式及結(jié)果
按照標(biāo)準(zhǔn)曲線,輸入吸光度求出濃度A(ug),然后按照下列公式計(jì)算出肉灌腸中的亞硝酸鹽含量mg/kg,通過(guò)計(jì)算查看樣品中的平均含量。
國(guó)家限量值30mg/kg,如果計(jì)算結(jié)果大于30mg/kg,則該樣品中亞硝酸鹽超標(biāo)。分光光度法加標(biāo)回收率在98.5%以上。
三、小結(jié)
購(gòu)買(mǎi)肉灌腸時(shí)對(duì)顏色鮮艷、特別好看的肉制品,最好謹(jǐn)慎購(gòu)買(mǎi)。
但是臘腸熏肉不一定亞硝酸鹽超標(biāo),肉類(lèi)食品加工中,亞硝酸鹽允許在法定范圍內(nèi)、按照許可安全劑量使用,以防止病原微生物生長(zhǎng)、保持肉類(lèi)色澤,會(huì)有利于肉類(lèi)的保存和運(yùn)輸。
比如我們常吃的火腿腸、臘腸、熏肉等,只要是正規(guī)產(chǎn)品,食用適量,就不用擔(dān)心安全問(wèn)題。
(內(nèi)容參考儀器信息網(wǎng))
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