一、瓊脂培養(yǎng)基的融化
將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高壓鍋中的層流蒸汽）使之融化。經(jīng)過高壓的培養(yǎng)基應(yīng)盡量減少重新加熱時(shí)間，融化后避免過度加熱。融化后應(yīng)短暫置于室溫中（如2 min）以避免玻璃瓶破碎。
融化后的培養(yǎng)基放入47℃～50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫(可根據(jù)實(shí)際培養(yǎng)基凝固溫度適當(dāng)提高水浴鍋溫度)，直至使用，培養(yǎng)基達(dá)到47℃～50℃的時(shí)間與培養(yǎng)基的品種、體積、數(shù)量有關(guān)。融化后的培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用，放置時(shí)間一般不應(yīng)超過4 h。未用完的培養(yǎng)基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培養(yǎng)基尤應(yīng)注意，融化后保溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短，如有特定要求可參考指定的標(biāo)準(zhǔn)。
傾注到樣品中的培養(yǎng)基溫度應(yīng)控制在約45℃左右。
二、平板的制備和儲存
傾注融化的培養(yǎng)基到平皿中，使之在平皿中形成厚度至少為3 mm（直徑90 mm的平皿，通常要加入18 mL～20 mL瓊脂培養(yǎng)基）。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存，或者培養(yǎng)時(shí)間超過48 h或培養(yǎng)溫度高于40 ℃，則需要傾注更多的培養(yǎng)基。凝固后的培養(yǎng)基應(yīng)立即使用或存放于暗處和（或）5℃±3℃冰箱的密封袋中，以防止培養(yǎng)基成分的改變。在平板底部或側(cè)邊做好標(biāo)記，標(biāo)記的內(nèi)容包括名稱、制備日期和（或）有效期。也可使用適宜的培養(yǎng)基編碼系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)記。
將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲存期限。為了避免冷凝水的產(chǎn)生，平板應(yīng)冷卻后再裝入袋中。儲存前不要對培養(yǎng)基表面進(jìn)行干燥處理。
對于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基，應(yīng)先對瓊脂表面進(jìn)行干燥：揭開平皿蓋，將平板倒扣于烘箱或培養(yǎng)箱中（溫度設(shè)為25℃～50℃）；或放在有對流的無菌凈化臺中，直到培養(yǎng)基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。
商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說明使用。
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