一、什么叫做老化
首先,我們要定義一下,什么叫做老化。
有兩種情況,第一種情況,新的柱子使用之前一般會先做老化,主要目的是去除鍵合不夠穩(wěn)定的固定相,讓新柱子性能更穩(wěn)定。另一種情況,是做了一天樣品,怕柱子里有殘留,也會說要老化一下柱子。
二、老化的重點是什么
老化的第一個重點是溫度。
老化的最高溫度通常推薦設(shè)為方法最高設(shè)定溫度和色譜柱耐受溫度的中間值。比如,這個方法的最高溫度是300度,色譜柱的耐受溫度是325,就可以老化到310度。
但要注意的是,不同的柱子耐受溫度有很大差別。極性強、膜厚大的柱子通常耐受溫度比較低,比如DB-wax 柱的恒溫耐受溫度只有250攝氏度,如果膜厚增加到0.5um,耐受溫度還會進一步下降到240攝氏度。
建議同學們老化之前要仔細看一下色譜柱的包裝盒或者說明書,因為超過溫度上限使用色譜柱對性能和壽命都影響很大。
具體的老化程序,通常會緩慢升溫至老化溫度,比如2~5攝氏度/min,然后再繼續(xù)老化2個小時 。
三、老化失敗最常見的原因是什么
避免氧氣的存在是老化失敗最常見原因。
因為高溫下的氧氣是破壞化學鍵的好手,而色譜柱里的固定相一旦氧化,彼此間的鍵鍵鏈接會被破壞,固定相就不再能穩(wěn)定“固定”在色譜柱里造成大量柱流失,柱效也會大幅下降。
從避免氧氣的角度,嚴格的老化需要注意以下幾點:
第一,把色譜柱末端伸入溶劑中,觀察是否有連續(xù)氣泡,如果沒有,要檢查是否漏氣,色譜柱斷裂或者堵塞。
第二,升溫前,先通15min載氣,置換掉色譜柱中可能存在的氧氣。
第三,確保其它接頭,正確安裝。
四、要連檢測器嗎
另外,從避免污染的角度來說新柱子老化的時候,最好不要連接檢測器,如果是FID檢測器,可以不用點火,也不用開氫氣和空氣。
五、去殘留該注意哪些
如果是已經(jīng)使用的柱子,怕有殘留,希望通過高溫老化去除污染物。
有些實驗室甚至每天都會在關(guān)機之前運行一針老化方法,但這種做法,其實是有一定風險的。因為這種污染,往往是沸點高的化合物,一般聚集在柱頭,比如樣品中的色素、蛋白質(zhì)、膠狀物等,盲目的老化可能會促使污染物更快的向后轉(zhuǎn)移,卻不能完全排出色譜柱,反而會污染整根柱子。
正確的做法應(yīng)該是先分析樣品的成分和污染情況,如果是存在老化溫度也不能完全氣化的成分,比如色素、蛋白質(zhì)、膠狀物等,那在老化之前應(yīng)當先進行色譜柱的維護,包括換襯管、色譜柱柱頭切割,去除污染源再做老化,才是有意義的。
六、小結(jié)
老化的要點包括
1、查看說明書,確定老化溫度
2、檢查儀器連接,確保無氧
3、最好不接檢測器
4、必要時,先做進樣口維護
5、緩慢升溫至老化溫度,保持2小時
(內(nèi)容來源色譜學堂)
相關(guān)閱讀: