污染是導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗的一個(gè)主要因素，因而，二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們?cè)O(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生，其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長(zhǎng)的區(qū)域和表面，并結(jié)合自動(dòng)排除污染裝置來(lái)有效防止污染的產(chǎn)生。
例如，鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過(guò)程中有時(shí)會(huì)伴有霉菌生長(zhǎng)，為確保培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性，相繼問(wèn)世了多種消毒滅菌方式，如帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)箱；還有的設(shè)計(jì)生產(chǎn)了HEPA過(guò)濾器能過(guò)濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣，可過(guò)濾除去99.97%的0.3微米以上的顆粒；此外，還開發(fā)設(shè)計(jì)了能使箱內(nèi)達(dá)到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物，達(dá)到消毒滅菌目的的培養(yǎng)箱。
這些裝置對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)是必不可少，但選擇何種清潔裝置呢？首先，我們考慮的當(dāng)然是各種方式的滅菌能力，紫外消毒能力是與紫外燈距離目標(biāo)的距離的二次方成反比，距離越遠(yuǎn)，消毒能力越差，所以紫外消毒方式有其局限性，難以達(dá)到徹底滅菌的要求；HEPA過(guò)濾器由于受到過(guò)濾膜孔徑的影響，無(wú)法去除病毒和一些微小細(xì)菌，也有其局限性；相比較而言，高溫消毒是目前比較有效消毒滅菌的方法，高溫消毒又分為兩類，一是傳統(tǒng)的高溫干熱消毒，另一種是先進(jìn)的高溫濕熱滅菌。
接下來(lái)我們重點(diǎn)說(shuō)一下高溫干熱和高溫濕熱兩種方法的優(yōu)劣。高溫濕熱由于蒸汽潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，因此該法的滅菌效率比干熱滅菌法高。其原因有三：①蛋白質(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān)，含水量愈大，發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分，所以較同一溫度的干熱空氣中易于凝固。②濕熱滅菌過(guò)程中蒸汽放出大量潛熱，加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所需溫度低，如在同一溫度下，則濕熱滅菌所需時(shí)間比干熱短。③濕熱的穿透力比干熱大，使其深部也能達(dá)到滅菌溫度，故濕熱比干熱收效好一些。所以高溫消毒并不是簡(jiǎn)單的看消毒溫度，主要是看是否濕熱消毒。另外，從使用角度看，濕熱消毒一般控制在90°C就能達(dá)到很徹底的消毒效果，整個(gè)消毒過(guò)程中培養(yǎng)箱內(nèi)的所有附件都不用取出，可以全部進(jìn)行消毒；而干熱消毒為了達(dá)到較好的效果，溫度一般都在100°C以上，在這種溫度下消毒培養(yǎng)箱內(nèi)的傳感器、HEPA過(guò)濾器等都要在消毒過(guò)程中取出，等消毒結(jié)束再裝上，這樣即麻煩，附件又不能同時(shí)消毒，而且增加二次污染的幾率，再者要達(dá)到100°C以上的高溫，培養(yǎng)箱的加熱系統(tǒng)的電熱絲必然要加粗，這會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)箱的溫度控制難度增加，均一性變差。
所以我們建議用戶在選購(gòu)二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)選擇含高溫濕熱滅菌方式的培養(yǎng)箱。
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