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一、熒光分光光度計(jì)的選購(gòu)
選購(gòu)熒光分光光度計(jì)應(yīng)考慮以下三方面:
1、是否有正規(guī)廠(chǎng)家和檢測(cè)標(biāo)識(shí)
選購(gòu)本儀器時(shí)應(yīng)注重對(duì)廠(chǎng)家資質(zhì)的篩查,務(wù)必權(quán)衡生產(chǎn)廠(chǎng)家的正規(guī)性,需悉心檢查提供的紙質(zhì)證明資料。拿到產(chǎn)品之后應(yīng)先查找外包裝的檢測(cè)標(biāo)識(shí),但凡經(jīng)過(guò)檢驗(yàn)的設(shè)備均會(huì)附有該標(biāo)識(shí),如若沒(méi)有的話(huà)則直接詢(xún)問(wèn)銷(xiāo)售人員,防止三無(wú)類(lèi)型的產(chǎn)品。
2、是否有全面的服務(wù)
選購(gòu)儀器時(shí)應(yīng)注重對(duì)服務(wù)的明確,完備的售后將會(huì)省卻很多繁瑣之事。在與銷(xiāo)售人員溝通的過(guò)程中,消費(fèi)者應(yīng)詢(xún)問(wèn)清楚關(guān)于服務(wù)的具體類(lèi)目和期限,例如產(chǎn)品出現(xiàn)問(wèn)題之后的解決途徑。
3、是否有實(shí)際演示的環(huán)節(jié)
選購(gòu)本儀器時(shí)還應(yīng)注重面對(duì)面的實(shí)際操作,這一步驟關(guān)乎到后續(xù)使用的質(zhì)量,以及光度針性能的良好度。透過(guò)直觀(guān)的表象來(lái)品味設(shè)備性能的優(yōu)劣度,這部分內(nèi)容不可單從銷(xiāo)售人員一方的敘述得出,而應(yīng)加以綜合性的評(píng)判。
4、價(jià)格
消費(fèi)者應(yīng)提前了解以下產(chǎn)品價(jià)格,甄別價(jià)格過(guò)高或過(guò)低的現(xiàn)象。同時(shí)考慮自己的預(yù)算來(lái)選擇合適的儀器。
- 熒光分光光度計(jì)的正確操作
1、軟件操作
熒光分光光度計(jì)定量分析時(shí)多采用工作曲線(xiàn)法,即以已知量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),按試樣相同方法處理后,配成一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,測(cè)定其相對(duì)熒光強(qiáng)度和空白溶液的相對(duì)熒光強(qiáng)度,扣除空白值后,以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),繪制工作曲線(xiàn)。然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液,在同一條件下測(cè)定其相對(duì)熒光強(qiáng)度,扣除空白值后,從工作曲線(xiàn)上求出熒光物質(zhì)的含量。
在熒光分光光度計(jì)用熒光分析法測(cè)定某些會(huì)引起熒光改變的微量物質(zhì)時(shí),常采用差示熒光法,可使熒光強(qiáng)度的讀數(shù)差距拉大,使熒光強(qiáng)度的降低加大,從而提高方法的靈敏度和準(zhǔn)確度。
2、硬件操作
在使用時(shí)需要注意開(kāi)機(jī)次序,熒光分光光度計(jì)開(kāi)機(jī)順序一般為先開(kāi)氙燈,然后開(kāi)儀器主機(jī),接著開(kāi)跟儀器連接的計(jì)算機(jī)。如此操作的原因在于穩(wěn)態(tài)氙燈是高壓點(diǎn)亮,為了避免瞬問(wèn)脈沖電流對(duì)周?chē)O(shè)備造成影響,需要先開(kāi)氙燈,等電流穩(wěn)定后再打開(kāi)周邊的電腦等設(shè)備。關(guān)機(jī)順序則相反。
- 熒光分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)
1、樣品應(yīng)盛在四面透光的石英比色皿(熒光池)中,如果是揮發(fā)性樣品應(yīng)使用帶塞的熒光池。
2、在使用儀器進(jìn)行熒光分析時(shí),為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù),一般需要開(kāi)機(jī)預(yù)熱氙燈大約30分鐘。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈,預(yù)熱時(shí)間可以縮短到10分鐘左右。對(duì)某些易感光、易分解的熒光物質(zhì),盡量采用長(zhǎng)波長(zhǎng)、低人射光強(qiáng)度及短時(shí)間光照。
3、溫度變化可引起儀器熒光強(qiáng)度的改變。通常降低溫度,有利于提高熒光量子產(chǎn)率,熒光強(qiáng)度增大。溫度影響熒光強(qiáng)度的顯著程度因樣品而異,大部分熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度受溫度影響不大,測(cè)試溫度變化不超過(guò)±3℃,對(duì)測(cè)試結(jié)果幾乎無(wú)影響。
4、當(dāng)儀器的熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時(shí),溶液的pH對(duì)熒光強(qiáng)度有較大影響。因?yàn)槿跛峄蛉鯄A在不同酸度中,分子和離子的電離平衡會(huì)發(fā)生改變,而熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度會(huì)因其離解狀態(tài)發(fā)生改變。
5、熒光分光光度計(jì)的熒光物質(zhì)分子與溶液中其它物質(zhì)分子之間作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低,常見(jiàn)的熒光猝滅劑,如鹵素離子、重金屬離子、02、硝基化物質(zhì)、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質(zhì)產(chǎn)生不同程度的熒光熄滅現(xiàn)象,因此在較嚴(yán)格的熒光實(shí)驗(yàn)中必須除氧。