色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類，液相色譜通常均采用填充柱。本文主要介紹液相色譜柱使用注意事項(xiàng)。
1、色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力。為獲得最佳分離效果，使用時(shí)請(qǐng)不要超過200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會(huì)造成硅膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
2、注意溫度，除特殊要求外最高操作溫度不要超過60℃。
3、如果流動(dòng)相含有酸或無機(jī)鹽，應(yīng)當(dāng)先用去離子水(20倍柱體積)沖洗干凈，然后用100%乙腈或甲醇保存色譜柱，最后用柱子的接頭密封，防止溶劑揮發(fā)干燥，并放在穩(wěn)定的環(huán)境中存放。
4、絕對(duì)禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
5、應(yīng)避免色譜柱受到直接的機(jī)械沖擊或摔落，避免造成色譜柱性能的降低。
6、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/span>
7、一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)，否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
8、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱，保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱，保護(hù)柱應(yīng)該經(jīng)常更換。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱（5～30mm），可以起到保護(hù)、延長(zhǎng)柱壽命的作用。雖然采用保護(hù)柱會(huì)損失一定的柱效但這是值得的。
9、經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí)，對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50~75ml。
10、通常色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上，以硅膠為基質(zhì)的填料，只能在pH=2～9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時(shí)間后，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙�。每次工作完后，最好用洗脫能力�?qiáng)的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí)，使用完后應(yīng)用無鹽流動(dòng)相沖洗。含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道，不宜長(zhǎng)期與之接觸
11、新的色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷，使柱效下降，這時(shí)也可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù)。
12、裝在高效液相色譜儀上柱子如不經(jīng)常使用，應(yīng)每隔4～5天開機(jī)沖洗15分鐘。
