熒光分光光度計(jì)是常用的定性定量分析測試儀器，廣泛適用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保監(jiān)測等部門。怎樣用熒光分光光度計(jì)測定樣品濃度呢？本文以棱光F95S為例，說明熒光分光光度計(jì)測定樣品濃度的步驟。
棱光F95S熒光分光光度計(jì)
一、使用標(biāo)樣功能測定樣品濃度
1、使用標(biāo)樣功能的條件
(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線基本過零點(diǎn)；
(2)分析規(guī)程較穩(wěn)定；
(3)標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度愈接近參比樣品濃度測定結(jié)果愈準(zhǔn)確，一般在要求定量濃度范圍 2/3 左右為可。
2、使用標(biāo)樣功能方法測定樣品濃度的步驟
(1)按下儀器總電源開關(guān)。
(2)主機(jī)預(yù)熱 30 分鐘。
(3)旋轉(zhuǎn)“波長調(diào)節(jié)旋鈕”，至標(biāo)準(zhǔn)樣品吸收光譜峰值波長處。
(4)按“模式”選擇鍵，進(jìn)入主菜單界面，選擇執(zhí)行熒光值測定功能。
(5)準(zhǔn)備樣品
配置好標(biāo)準(zhǔn)樣品 4-5 份，如按樣品溶液濃度從低到高依次為 A1、A2、A3、A4、A5。熒光樣品池一盛參比溶液作參比（或試劑空白），熒光樣品池二裝入標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液 A5 然后用擦鏡紙將四壁擦試干凈。
(6)靈敏度設(shè)定
打開樣品室蓋，樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“歸一”調(diào)整鍵，調(diào)節(jié)至LCD液晶顯示窗顯示熒光值顯示在 10-100 左右之間，記下此時(shí)的靈敏度檔位。
(7)調(diào)零
打開樣品室蓋，取出樣品池二，把樣品池一置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“調(diào)零”調(diào)整鍵，儀器自動調(diào)整 0%，至 LCD 液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%止。如發(fā)現(xiàn) 0%有漂移，繼續(xù)按下“調(diào)零”調(diào)整鍵，直至 LCD 液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。
(8)按“模式”選擇鍵，執(zhí)行標(biāo)樣測定功能。
(9)放入標(biāo)準(zhǔn)樣品并進(jìn)行標(biāo)樣：打開樣品室蓋，取下樣品池一，然后把熒光樣品池二置入樣品室內(nèi)的樣品座上，合上樣品室蓋。然后輸入該樣品的濃度，熒光值為直接獲取當(dāng)前樣品的熒光值，然后按下確定鍵，進(jìn)入下一個(gè)標(biāo)樣設(shè)定。
(10)打開樣品室蓋，倒出樣品池二里的溶液并清洗干凈，然后注入A4標(biāo)準(zhǔn)樣品，擦干樣品池外壁并放置到樣品座上。合上樣品室蓋。然后輸入該樣品的濃度，熒光值為直接獲取當(dāng)前樣品的熒光值，按下確定鍵，進(jìn)入下一個(gè)標(biāo)樣設(shè)定。
(11)重復(fù)第（10）步序，依次進(jìn)行A3、A2、A1 標(biāo)準(zhǔn)樣品的標(biāo)樣設(shè)定，按下確定鍵進(jìn)入濃度顯示界面。
(12)放入待測樣品并讀數(shù)：打開樣品室蓋，倒出樣品池二里的溶液，清洗干凈后注入待測溶液。然后把樣品池二置入樣品室內(nèi)的樣品座上，關(guān)閉樣品室蓋。待 LCD 液晶顯示窗顯示的數(shù)值穩(wěn)定下來之后即可讀出儀器測得的待測樣品的熒光值和濃度。
(13)繼續(xù)測定其它樣品，或關(guān)閉儀器總電源開關(guān)。
二、使用系數(shù)功能測定樣品濃度
1、使用系數(shù)功能測定樣品濃度的條件：斜率和截距已知。
2、使用系數(shù)功能測定樣品濃度的步驟
(1)按下儀器總電源開關(guān)。
(2)主機(jī)預(yù)熱 30 分鐘。
(3)旋轉(zhuǎn)“波長調(diào)節(jié)旋鈕”，至標(biāo)準(zhǔn)樣品吸收光譜峰值波長處。
(4)按“模式”選擇鍵，進(jìn)入主菜單界面，選擇執(zhí)行熒光值測定功能。
(5)準(zhǔn)備樣品：熒光樣品池一盛參比溶液（或試劑空白），熒光樣品池二裝入待測樣品溶液然后用擦鏡紙將四壁擦試干凈。
(6)靈敏度設(shè)定：打開樣品室蓋，樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“歸一”調(diào)整鍵，調(diào)節(jié)至LCD液晶顯示窗顯示熒光值顯示在 10-100 左右之間，記下此時(shí)的靈敏度檔位。
(7)調(diào)零：打開樣品室蓋，樣品池一置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“調(diào)零”調(diào)整鍵，儀器自動調(diào)整0%，至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%止。如發(fā)現(xiàn) 0%有漂移，繼續(xù)按下調(diào)零調(diào)整鍵，直至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。
(8)設(shè)定系數(shù)：按“模式”選擇鍵，進(jìn)入主菜單界面，選擇執(zhí)行系數(shù)測定功能并輸入已知的斜率和截距。然后按下確定鍵，濃度顯示界面。
(9)讀數(shù)：打開樣品室蓋，樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。待 LCD 液晶顯示窗顯示的數(shù)值穩(wěn)定下來之后由LCD液晶顯示窗直接讀出儀器測得的待測樣品的熒光值和濃度。
(10)繼續(xù)測定其它樣品，或關(guān)閉儀器總電源開關(guān)。
