一、方法原理
試樣中六六六、滴滴涕經(jīng)提取、凈化后用毛細管柱氣相色譜分離與測定，以保留時間定性，外標法定量。電子捕獲檢測器對于負電極強的化合物具有極高的靈敏度，利用這一特點，可分別測出痕量的六六六、滴滴涕。不同異構體和代謝物可同時分別測定。
二、主要儀器設備
2.旋轉蒸發(fā)儀。
3.氮氣濃縮器。
4.勻漿機。
5.調(diào)速多用振蕩器。
6.離心機。
7.植物樣本粉碎機。
三、試劑
1 丙酮CH3COCH3：分析純，重蒸。
2 正己烷n-C6H14：分析純，重蒸。
3 石油醚：沸程30℃~60℃，分析純，重蒸。
4 苯C6H6：分析純。
5.硫酸H2SO4：優(yōu)級純。
6.無水硫酸鈉Na2SO4：分析純。
7.硫酸鈉溶液20g/L。
8.農(nóng)藥標準品：六六六α-HCH、β- HCH、γ- HCH、δ- HCH、p,p’-DDE 、o,p’-DDT p,p’-DDD 和p,p’-DDT純度不低于98%。
9.農(nóng)藥標準儲備液：精密稱取α-HCH、β- HCH、γ- HCH、δ- HCH、p,p’-DDE 、o,p’-DDT p,p’-DDD 和p,p’-DDT各10mg，溶于苯中，分別移于100mL容量瓶，以苯稀釋至刻度，混勻，濃度為100mg/L，貯存于冰箱中。
10.農(nóng)藥混合標準工作液：分別量取上述各標準儲備液適量于同一容量瓶中，以正己烷稀釋至刻度配成一系列混合標準溶液。
四、操作步驟
1、標準曲線的繪制
2、樣品處理
2.1.試樣制備
谷類制成粉末，其制品勻漿；蔬菜、水果及其制品制成勻漿；蛋白去殼制成勻漿；肉品去皮、筋后，切成小塊，制成肉糜；鮮乳混勻待用； 混勻待用。
2.2提取
2.2.1食品勻漿類：稱取具有代表性的各類食品樣品勻漿20g，加水5mL視樣品水分含量加水，使總水量約20mL，加丙酮40mL，振蕩30min，加氯化鈉6g，搖勻。加石油醚30mL，再振蕩30min，靜置分層。取上清液35mL經(jīng)無水硫酸鈉脫水，于旋轉蒸發(fā)器中濃縮至近干，以石油醚定容至5mL，加濃硫酸0.5mL凈化，振搖0.5min，于3000r/min離心15min，取上清液進行GC分析。
2.2.2.粉末樣品：稱取具有代表性的2g粉末樣品，加石油醚20mL，振蕩30min，過濾，濃縮，定容至5mL，加濃硫酸0.5mL凈化，振搖0.5min，于3000r/min離心15min，取上清液進行GC分析。
2.2.3.食用油樣品：稱取具有代表性的食用油樣品0.5g，以石油醚溶解于10mL刻度試管中，定容至刻度。加1.0mL濃硫酸凈化，振搖0.5min，于3000r/min離心15min，取上清液進行GC分析。
3、測定
3.1.色譜參考條件
3.1.1.色譜柱：HP-5石英彈性毛細管柱，30m-0.32mm-0.5μm或等效柱。
3.1.2.柱溫：程序升溫
90℃1min40℃/min170℃3℃/min200℃2min20℃/min250℃15min
3.1.3.進樣口溫度：250℃
3.1.4.檢測器：電子捕獲檢測器ECD，溫度：250℃。
3.1.5.尾吹：45mL
3.1.6.分流進樣，分流流量：5mL/min，進樣量：1μL。
3.1.7.柱前壓：0.05MPa。
4、色譜分析
分別吸取1μL混合標準液及試樣凈化液注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以保留時間定性，以試樣和標準的峰面積定量。
5、色譜圖
色譜圖出峰順序依次為α-HCH、β- HCH、γ- HCH、δ- HCH、p,p’-DDE 、o,p’-DDT p,p’-DDD 和p,p’-DDT。
6、結果計算
試樣中各農(nóng)藥的含量按下式進行計算：
式中：
X——試樣中各農(nóng)藥的含量，單位為毫克每千克mg/kg；
m1——被測樣液中各農(nóng)藥的含量，單位為納克ng；
V1——樣液進樣體積，單位為微升μL；
f——稀釋因子稀釋倍數(shù)
m——試樣質(zhì)量，單位為克g；
V2——樣液最后定容體積，單位為毫升mL。
計算結果保留兩位有效數(shù)字。
7、精密度
在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的20%。
